HPLC的出現(xiàn)不過三十多年的時間，但這種分離分析技術(shù)的發(fā)展十分迅猛，目前應(yīng)用也十分廣泛。其儀器結(jié)構(gòu)和流程也多種多樣。典型的高效液相色譜儀結(jié)構(gòu)和流程可用方框圖表示。超高效液相色譜儀一般都具備貯液器、高壓泵、梯度洗提裝置(用雙泵)、進樣器、色譜柱、檢測器、恒溫器、記錄儀等主要部件。

 

　　超高效液相色譜儀主要應(yīng)用于：

　　1、藥物分析：如天然產(chǎn)物中復(fù)雜組分的分析。

　　2、生化分析：如蛋白質(zhì)、多肽、代謝組學(xué)等生化樣品。

　　3、食品分析：如食品中農(nóng)藥殘留的檢測。

　　4、環(huán)境分析：如水中微囊藻毒素的檢測。

　　5、其他：如化妝品中違禁品的檢測。

　　超高效液相色譜儀尤其對中藥研究領(lǐng)域的發(fā)展是一個極大的促進。中藥的組分復(fù)雜，分離困難等問題都可以通過超高效液相色譜法逐漸解決。在同樣條件下，UPLC能分離的色譜峰比HPLC多出一倍還多。在同樣條件下，UPLC的分辨率能夠認(rèn)出更多的色譜峰。

 

　　超高效液相色譜主要類型：

　　1、液液分配色譜分離原理：分配色譜法的原理與液液萃取相同，都是分配定律。

　　2、液固吸附色譜分離原理：液固色譜是基于各組分吸附能力的差異進行混合物分離的，其固定相是固體吸附劑。

　　3、鍵合相色譜分離原理：正鍵合相色譜分離遠離：使用的是極性鍵和固定性，溶質(zhì)在此類固定相。上的分離機理屬于分配色譜。

 

　　儀器操作：

　　1、開機，啟動裝置，進入Win2000；開啟LC，點擊Instrumentl online圖標(biāo)， 進入儀器控制面板，設(shè)置所需各項參數(shù)。

　　2、設(shè)置分析用流動相清洗流路，等待色譜柱、系統(tǒng)的平衡，基線穩(wěn)定，開始進樣分析。

　　3、分析結(jié)束，數(shù)據(jù)處理，打印報告。

　　4、關(guān)閉柱溫箱和檢測器，沖洗色譜柱，關(guān)閉脫氣機、泵，關(guān)閉整個裝置。

　　5、關(guān)閉總電源。

　　6、在記錄本上記錄使用情況。